[国内标准]食药监总局发布《植物蛋白饮料中植物源性成分鉴定》食品补充检验方法(2017年第75号)
按照《食品补充检验方法工作规定》,《植物蛋白饮料中植物源性成分鉴定》食品补充检验方法已经国家食品药品监督管理总局批准,近日对外发布。
附件
植物蛋白饮料中植物源性成分鉴定
BJS 201707
1 范围
本方法规定了食品核桃源性成分、花生源性成分、杏仁源性成分、芝麻源性成分、榛子源性成分、大豆源性成分鉴定的实时荧光PCR方法。
本方法适用于核桃露(乳)、杏仁露、果仁露等复合植物蛋白饮料中标识含有核桃源性成分、花生源性成分、杏仁源性成分、芝麻源性成分、榛子源性成分、大豆源性成分的检测及鉴定。
2 原理
提取试样中基因组DNA,以DNA为模板,利用物种特异性引物及探针进行实时荧光PCR扩增检测,同时设置阳性、阴性及空白对照。根据扩增的Ct值,判定试样中是否含有该源性成分。
3试剂和材料
除另有规定外,试剂为分析纯或生化试剂。实验用水符合GB 6682的要求。所有试剂均用无
DNA酶污染的容器分装。
3.1核桃源性成分Jugr2基因检测用引物对序列为:
核桃5’端引物:5’-CGCGCAGAGAAAGCAGAG-3’
核桃3’端引物:5’-GACTCATGTCTCGACCTAATGCT-3’
核桃探针:5’-FAM-TTGTGCCTCTGTTGCTCCTCTTCCC-TAMRA-3’
3.2花生源性成分Ara b2基因检测用引物(对)序列为:
花生5’端引物:5’-GCAACAGGAGCAACAGTTCAAG-3’
花生3’端引物:5’-CGCTGTGGTGCCCTAAGG-3’
花生探针:5’-FAM-AGCTCAGGAACTTGCCTCAACAGTGCG-Eclipse-3’
3.3 杏仁源性成分Prudul基因检测用引物(对)序列为:
杏仁5’端引物:5’-TTTGGTTGAAGGAGATGCTC-3’
杏仁3’端引物:5’-TAGTTGCTGGTGCTCTTTATG-3’
杏仁探针:5’-FAM-TCCATCAGCAGATGCCACCAAC- Eclipse-3’
3.4芝麻源性成分2S albumim mRNA基因检测用引物(对)序列为:
芝麻5’端引物:5’-CCAGAGGGCTAGGGACCTTC-3’
芝麻3’端引物:5’-CTCGGAATTGGCATTGCTG-3’
芝麻探针:5’-FAM-TCGCAGGTGCAACATGCGACC- TAMRA-3’
3.5榛子源性成分oleosin基因检测用引物(对)序列为:
榛子5’端引物:5’-CCCCGCTGTTTGTGATAT-3’
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